談?wù)劽嘎?lián)免疫吸附測定法。
免疫酶技術(shù)根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相和異相兩種類型。在異相法中,又包括液相異相酶免疫測定和固相酶免疫測定二種。固相酶免疫測定也稱為ELISA,是臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣的免疫測定方法。小分子的ELISA測定法一般有三種競爭分析模式:包被特異性抗體直接競爭法、包被抗原直接競爭法以及間接競爭法。間接競爭ELISA法的基本步驟是:包被抗原--同時(shí)加入已知抗體和待測抗原--加入酶標(biāo)二抗--加入底物顯色液。該法主要應(yīng)用于未知抗原的檢測。
酶聯(lián)免疫吸附法靈敏、準(zhǔn)確、可定量、操作簡便、不用貴重儀器設(shè)備,且對(duì)樣品純度要求不高,特異性好,適用于大批量樣品的檢測,發(fā)展快。簡化了樣品預(yù)處理和純化過程。但是由于免疫酶的活性不穩(wěn)定,在應(yīng)用過程中很容易受到操作條件的影響,反應(yīng)試劑需低溫保存。在實(shí)際操作過程中很難達(dá)到這一要求,使得免疫酶的活性下降,從而影響到結(jié)果的準(zhǔn)確性。應(yīng)用時(shí)還須通過多次洗滌,才能使反應(yīng)產(chǎn)物和游離底物進(jìn)行分離,影響到結(jié)果的重復(fù)性,而且檢測時(shí)間較長,無法達(dá)到現(xiàn)場檢測的要求。
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